ANTIBIOGRAMA DE MUELLER HINTON

FUNDAMENTO

En esta práctica realizaremos una siembra en césped, en placa con Mueller Hintón, para colocar distintos antibióticos y conocer qué antibiótico es el idóneo para ináctivar la población.

El objetivo final de la práctica es identificar el antibiótico que va a ser capaz de inhibir el crecimiento bacteriano.

MATERIAL

-Medios Mueller Hintón

-Bacterias 5 y 11

-SSF

-Tubos de ensayo

-Gradilla

-Asa de siembra

-Mechero bunsen

-Asa de Digralsky

-Vaso de precipitados

-Alcohol

-Pinzas

-Antibióticos (Colistín, amoxicilína + Ac. clavulánico, Amikacin, Azlocillin)

-Mícropipeta de 100 microlítros

-Puntas de mícropipeta

PROCEDIMIENTO

Echamos en un tubo de ensayo un poco de SSF. Cogemos el tubo con nuestra bacteria, esterilizamos el asa de platino, pasamos la boca del tubo por el mechero y cogemos un poco de muestra. Volvemos a pasar el tubo por el mechero, e introducimos el asa en el SSF, moviendolo de lado a lado para que se desprenda la muestra y se homogeinice. Vamos comparando con el patrón 0,5 de la escala McFarland, si nos falta turbidez, repetimos el procedimiento, si nos hemos pasado, añadimos SSF.

 

 

Rotulamos la placa de petri con la fecha y el número de muestra. Con la micropipeta, cogemos 100 microlitos de la suspensión y los depositamos en la placa. Mojamos el asa de Digralsky en alcohol y la llevamos el mechero para esterilizarla. Con ella vamos repartiendo la suspensión por toda la placa, para hacer una siembra en cesped.

Finalmente, elegimos los antibióticos que vamos a usar. Mojamos las pinzas en alcohol y las esterilizamos en el mechero. Cogemos el disco con el antibiótico y lo depositamos en la placa, todos los discos tienen que estar equidistantes. Apretamos un poco los discos con las pinzas para clavarlos en el agar.

Incubamos a 37º C durante 18 horas, y vemos cuál ha sido el antibiótico más eficaz.

RESULTADOS

Tras incubarlas, podemos comprobar como alrededor de algunos antibióticos no se ha producido crecimiento bacteriano. Por tanto, podemos concluir, según el diametro de los circulos donde no hay crecimiento, lo siguiente:

La bacteria número  5 presenta resistencia ante el antibiótico Azlocillin, sensibilidad media ante Colistín, y es sensible ante Amikacin y Amoxicilina con Ácido Clavulánico.

La bacteria número 11 presenta resistencia ante Azlocillin, Colistin y Amoxicilina con Ácido Clavulánico, y es sensible al Amikacin.

Bacteria 5                                                     Bacteria 11

 

MOX5=14X2=28                                    MOXIFLOXACIN:18X2=36

F300=12X2=24                                      NITROFURANTOIN:13X2=26

PL20=10X2=20                                      PIPEMIDIC-ACID:12X2=24

NET30=22X2=44                                  NETILMICIN:18X2=36

MEDICIÓN REALIZADA POR EL MÉTODO:KIRBY-BANEN