ESCALA DE MCFARLAND

FUNDAMENTO:

La utilidad de la escala es poder realizar suspensiones bacterianas ajustadas a un patrón, generalmente se suele usar el 0,5 Mc Farland, para esto se toma una muestra de nuestra bacteria y la inoculamos en un tubo con solución salina, en el momento en que se produzca un poco de turbidez ya estamos en el 0,5 (de forma visual).

La finalidad, es establecer una relación entre una precipitación química y una suspensión bacteriana.

Se trata de un recuento indirecto de bacterias. Se compara la turbidez de las muestras con los tubos de la escala McFarland siendo el objetivo principal:

Realizar una serie de tubos para diluciones seriadas de cultivo en medio líquido.

Conocer el número aproximado de microorganismos presentes en la muestra.

MATERIAL:

-11 tubos

-Cloruro de bario

-Ácido sulfúrico

-Pipeta de 10ml y de 5ml

-Micropipetas

-Vaso de precipitados

-Puntas de pipeta

-Cremallera

-Gradilla

-Cabina

-Matraces

CÁLCULOS

0,5 -  0,125ml de BaCl2 y 24,875ml de H2SO4

1 - 0,2ml de BaCl2 y 24,75ml de H2SO4

2 - 0,5ml de BaCl2 y 24,5ml de H2SO4

3 - 0,75ml de BaCl2 y 24,25ml de H2SO4

4 - 1ml de BaCl2 y 24ml de H2SO4

5 - 1,25ml de BaCl2 y 23,75ml de H2SO4

6 - 1,5ml de BaCl2 y 23,5ml de H2SO4

7 - 1,75ml de BaCl2 y 23,25ml de H2SO4

8 - 2ml de BaCl2 y 23ml de H2SO4

9 - 2,25ml de BaCl2 y 22,75ml de H2SO4

10  - 2,5ml de BaCl2 y 22,5ml de H2SO4

PROCEDIMIENTO

Lo primero que tenemos que hacer es preparar las diluciones de H2SO4 y BaCl2. Para ello, necesitaremos un matraz de 500ml y otro de 50ml.

El H2SO4 lo necesitaremos al 1%, por tanto, si el total del matraz son 500ml, tendremos que echar 5ml de H2SO4 y 495ml de agua destilada. Es importante que echemos antes un poco de agua, ya que si no el ácido puede saltar y quemarnos.

Para el BaCl2, que lo queremos al 1,175%, necesitamos un matraz de 50ml, por tanto, tendremos que pesar 0,5875 gramos de BaCl2, y enrasar el matraz con agua destilada.

Rotulamos todos los tubos antes de hacer las disoluciones, con 0,5 , 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, y 10.

Vamos echando en cada tubo la cantidad correspondiente de cada uno de los reactivos, y tapandolos conforme acabemos.

Cuando los tengamos todos hechos, los agitamos para que se homogeinicen correctamente. Si queremos conservarlos, debemos guardarlos en una zona oscura a temperatura ambiente

MEDIDAS DE SEGURIDAD:

Extremar la precaución al la hora de manipulas los productos químicos,ya que son tóxicos si se crean vapores y son inhalados,para ello,el trabajo se debe llevar a cabo dentro de la campana extractora  en funcionamiento y utilizando los E.P.I. correctamente.

todo debe  quedar bien rotulado,evitando posibles accidentes en la manipulación.

RESULTADOS

Con la escala McFarland conseguimos 11 tubos con distinta turbidez