Entradas

Mostrando entradas de febrero, 2018

PRUEBA DE LA POTASA

Imagen
FUNDAMENTO: Esta técnica se utiliza en los laboratorios como test de sreening o prueba de discriminación rápida que nos dice en un tiempo limitado,si las bacterias con las que vamos a trabajar son GRAM-negativas  o GRAM-positivas,dependiendo de la reacción que se origina al ponerlas en contacto con la potasa. MATERIALES Y REACTIVOS: -papel de filtro                                                                preparación de KOH -portaobjetos -mechero bunsen                                                              - agua destilada -asa de siembra -mortero                                                                           - KOH al 3% -balanza  -vidrio de cristal -matraz aforado 100ml -embudo -probeta PROCEDIMIENTO: -preparación de KOH: - Vamos a realizar una disolución en un matraz aforado de 100ml -la concentración que necesitamos es a un 3% y la casa comercial nos da el KOH a una concentración del 90%,con lo cual realizaremos los siguientes calculos

PRUEBA DE LA OXIDASA

Imagen
FUNDAMENTO: La citrocromooxidasa es una enzima que en presencia de oxígeno oxida la fenilendiamina y forma indofénol,que es un compuesto de color violeta.La prueba consiste en poner en contacto una colonia de bacterias con la fenilendiamina con el principal objetivo de saber si sintetiza oxídasa,lo cual se manifestará con un cambio de color. MATERIAL Y REACTIVOS: -papel de filtro -mechero bunsen -asa de siembra -muestra de cultivo en tubo 5 -tira reactiva PROCEDIMIENTO: - Depositar una colonia de bacterias sobre la zona reactiva de la tira,la colonia  debe proceder de un cultivo fresco(18-24h)y puro -Frotar la colonia sobre  la zona reactiva con el asa y esperar unos 10-30 segundos,posteriormente procederemos a la lectura de los resultados. MEDIDAS DE SEGURIDAD: -Extremar la precaución al utilizar el mechero bunsen y usar lo E.P.I. adecuadamente. RESULTADOS. -zona de reacción :azul-violeta-azulado:OXIDASA POSITIVA -zona de reacción :rosado o sin

PRUEBA DE CATALASA EN TUBO Y PORTAOBJETOS

Imagen
FUNDAMENTO: La catalasa hidroliza  el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno gaseoso,que se libera formando burbujas.El objetivo principal de la prueba consiste en añadir peróxido de hidrógeno a una colonia bacteriana y observar si forma burbujas. MATERIALES Y REACTIVOS: -papel de filtro -portaobjetos  -tubo de ensayo -mechero bunsen - asa de siembra  -pipeta pasteur -vaso de precipitado -peróxido de hidrógeno  -muestra(cultivo 5 y 11) PROCEDIMIENTO: -Depositamos unas gotas de peróxido de hidrógeno sobre un porta y en el caso de tubo de ensayo vertemos unos 2 mililitros  en su interior,se suele usar una disolución al 3%,aunque algunas bacterias requieren concentraciones superiores. -Encendemos en mechero creando un ambiente de esterilidad ,esterilizamos en asa y tomamos una muestras del cultivo y inoculamos el tubo de ensayo. -repetimos en proceso ,pero inoculando el portaobjetos. -Esperamos 15-20 segundos y efectuamos la lectura. MEDIDAS DE SE