practicas de microbiologia

FUNDAMENTO: La técnica de siembra en medio de cultivo consiste en depositar material bacteriológico para promover su crecimiento y multiplicación,en este caso,vamos a utilizar tres tipos de medios de cultivo,con la intención de poder observar que tipo de bacteria se multiplicara dependiendo de la afinidad de la bacteria al medio en el que se encuentra AGAR LEVINE: Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones Peptona 10.0 Suspender 37,4 g de polvo por litro de agua destilada, dejar reposar 5 minutos. Calentar a ebullición hasta disolución total. Distribuir y esterilizar 15 minutos a 121°C. Lactosa 10.0 Fosfato dipotásico 2.0 Agar 15.0 Eosina 0.4 Azul de metileno 0.065 pH final:7.1 ± 0.2 AGAR EMB: Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones   Peptona  10.0 Suspender 36 g del polvo en un litro de agua destilada. Reposar 5 minutos; mezclar, calentando a ebullición durante 1 o 2 minutos hasta su disolución. Esterilizar en autoc

FUNDAMENTO: La coagulasa es una enzima que convierte el fibrinógeno en fibrina,esta prueba permite detectar la capacidad de la bacteria de coagular el plasma por la acción de la coagulasa y  se  utiliza para diferenciar Staphylococcus aureus(coagulasa-positiva) y otras especies como Staphylococcus (coagulasa negativa) MATERIAL: - papel de filtro -tubos de ensayo -asa de siembra -mechero bunse -muestra tubos 11 y 5 -plasma sanguineo gradilla -parafilm  -baño maria PROCEDIMIENTO: Depositamos en dos tubo de ensayo 0,5 ml de plasma y lo inoculamos con una muestras de nuestros tubo 5 y 11 y tapamos con parafilm  incubamos durante dos hora y leemos los resultamos MEDIDAS DE SEGURIDAD: extremar la precaución con el mechero bunsen y comprobar que el baño tenga agua suficiente para realizar la incubación ,siempre que la resistencia este más que cubierta por el agua RESULTADOS: NO se observa coagulo,COAGULASA NEGATIVA

  FUNDAMENTO: Se utiliza para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos, a través de la observación de halos hemolíticos, y determinar el tipo de hemólisis: Alfa-hemolíticos, Beta-hemolíticos y no hemolíticos su objetivo principal ,es la clasificación en serogrupos basadas en las diferencias antigénicas de los carbohidratos de la pared celular (clasificación Lancefield)siendo factores importantes en la clasificación presuntiva Destacar:Alfa : Streptococcus  pneumoniae           Beta: Estreptococos GRUPO a y b           No hemolíticos:            Material, reactivos y muestra: -Papel de filtro. -Asa de siembra. -Mechero Bunsen. -Mechero. -Estufa. -Medio Agar Sangre. -Muestra de microórganimos. PROCEDIMIENTO : 1- Preparar el material. Rotular. 2- Ecender el Mechero Bunsen. 3- Flamear el tubo con microorganismo. 4- Flamear el asa de siembra. Tocar en las paredes para enfriar. Extraer inóculo de la muestra. Flamear el tubo de mu

FUNDAMENTO: PRUEBA DEL INDOL EN AGUA DE PEPTONA  L a triptófanasa es una enzima que degrada el triptófano,en esta degradación se libera (indol)para detectar si la bacteria les capaz de degradar este aminoácido se usa un reactivo,denominado KOVAC,que reacciona con el indol formando un compuesto de color rosa. MATERIAL Y REACTIVOS: -papel de filtro -pipeta pasteur gradilla -medios de cultivo (agua de peptona) -muestras(tubo 5 y 11) PROCEDIMIENTO: -inocular dos tubos con agua de peptona,uno con la muestra del tubo 5 y otro del tubo 11 -incubar  durante 24-48 horas. -añadimos 5 gotas de reactivo KOVAC en cada tubo y agitamos suavemente. RESULTADOS: Banda de color amarillo:indol negativo,nuestras bacterias no son capaces de degradar el triptófano. Para que fuera positivo,la banda deberia de ser de color rosa intenso o rojo violeta,pudiendo en este caso ,degradar el triptófano FUNDAMENTO:prueba de utilización de citrato. Esta prueba valora si una bacteria e

Agua Peptonada. Medio usado como diluyente y para enriquecimiento bacteriano a partir de alimentos y otros materiales de interés sanitario. Fundamento  Medio de enriquecimiento no selectivo, recomendado para ser utilizado en lugar de solución fisiológica para recuperar células de enterobacterias dañadas por procesos fisicoquímicos, a los que ha sido sometido el alimento. Si es utilizado como medio base para la fermentación de hidratos de carbono, se debe adicionar el indicador de Andrade y el hidrato de carbono en cuestión. Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones Peptona de carne   10.0 Suspender 15 g de polvo en 1 litro de agua destilada. Mezclar bien y distribuir. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Cloruro de sodio  5.0 pH final: 7.2 ± 0.2 Siembra Por inoculación directa del material en estudio. Como diluyente: realizar las diluciones 1:10 y 1:100, dependiendo del uso que se le quiera dar. Incubación  Aeróbica, a 35-37 ºC durante 18