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Mostrando entradas de diciembre, 2017

TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN

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FUNDAMENTO: L a propiedad que presentan algunas bacterias de resistir la decoloración con ácidos fuertes después de ser coloreadas con solución de fucsina caliente,permite denominarlas bacterias acido-resistentes o ácido -alcohol resistentes,esta resistencia es la capacidad de incorporar ciertos colorantes y retenerlos después de someterlos a la acción de los ácidos y alcohol y está determinada por la presencia en la pared celular de los ácidos micólicos que son ácidos grasos de cadenas ramificadas de alto peso molecular (60 o 70 átomos de carbono)siendo el objetivo principal de la técnica la visualización de bacterias ácido -alcohol resistentes. MATERIAL Y REACTIVOS: -guantes -mechero bunsen -fucsina -alcohol-clorhídrico -azul de metileno -agua destilada -alcohol -portas -pipeta pasteur -torunda -microscopio óptico PROCEDIMIENTO: - Preparar el material en el banco de trabajo. - Preparar una extensión fijada por calor en total 4 para nuestro caso 5,11,AAR1,AAR2 -

TINCIÓN DE WIRTZ-CONKLIN

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FUNDAMENTO: L as esporas son formas de resistencia que se forman en el interior del citoplasma de algunas bacterias,fundamentalmente de bacillus y clostridium La pared de las esporas es bastante impermeables por lo que cuesta teñirlas( se refuerza la coloración gracias a un mordiente) pero una vez teñidas,tras la decoloración perderá el color toda la bacteria excepto las esporas siendo el objetivo principal ,la visualización de dichas esporas.                                                             3. MATERIALES Papel de filtro Guantes 4 portaobjetos Mechero Bunsen Rejilla Torunda Colorantes Verde Malaquita al 5% y Safranina al 0,5% Piseta con agua destilada Microscopio Bacterias utilizadas: Bacteria 5, bacteria 11, Esp 1 y Esp 2 4. PROCEDIMIENTO  Preparar una extensión fijada por calor – Cogemos con ayuda del asa de siembra las bacterias tanto del tubo que                                 contiene bacteria 5, 11, Esp 1 y Esp 2 – Se deposita

TINCION DE GRAM

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  FUNDAMENTO:   La técnica de coloración de GRAM la empleamos para la visualización de bacterias,pudiendo identificar la morfología celular bacteriana como para su diferenciación bacteriana,considerándose bacterias GAM positivas a las que se visualizan de color morado y bacterias GAM negativas a las que se visualizan de color rojo o grosella o rosa,la pared celular bacteriana es la que determina la afinidad tintorial  MATERIALES Y REACTIVOS: Papel de filtro. Mechero Bunsen Portaobjetos Asa de siembra Suero fisiológico (SSF) Cristalizador Puente de tinción Tinción Gram : Cristal Violeta, Lugol, Alcohol/ acetona, Safranina Piseta con Agua destilada Microscopio 4. PROCEDIMIENTO Preparamos el banco de trabajo ( papel de filtro, Mechero Bunsen, cristalizador... ) Realizamos una extensión fijada por calor . -Una vez tenemos la extensión preparada, se fija mediante calor con ayuda del Mechero Bunsen Una vez fijada la extensión, colocamos el porta con

SIEMBRA EN PLACA PETRI POR AGOTAMIENTO

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FUNDAMENTO: La finalidad de la siembra por agotamiento es la de poder obtener colonias de bacterias. se realiza en placa de petrí ya que al tener más superficie de trabajo podemos agotar la muestras al estendér la muestra en el medio de cultivo que contiene la placa de petrí,deslizando el asa en varias direcciones en un orden lógico y en zig-zag de más saturado a menos. MATERIALES: -papel de filtro -mechero bunsen -asa de siembra placa de petrí (con ágar  nutritivo estéril ) -tubo con cultivo liquido de muestra salivar - gradilla  PROCEDIMENTO: -Preparamos el material en el banco de trabajo. -Encendemos el menchero bunsen creando un ambiente estéril. -Con una mano cogemos el tubo y con la otra en asa de siembra,esterilizamos el asa,abrimos el tubo que contiene la muestra y pasamos la boca del tubo por la llama. -Introducimos el asa en el tubo,antes de coger la muestras enfriamos el asa en el principio del medio de cultivo ,evitando así destruir la muestras,seguidament

SIEMBRA EN MEDIO INCLINADO

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FUNDAMENTO: Realizamos un cultivo en tubo inclinado en agár nutritivo,de una muestra proveniente de un cultivo de mucosa bucal en medio liquido,de esta manera obtendremos en superficie un gran numero de bacterias que mediante pase podremos ir aislando en otros cultivos. MATERIALES Y REACTIVOS: -papel de filtro -mechero bunsen -asa de siembra -gradilla -tubo de ensayo(cultivo mucosa bucal) -tubo de ensayo con A.N inclinado PROCEDIMIENTO: -Preparamos el material en el banco de trabajo de manera ordenada -Encendemos el mechero,creando un ambiente de esterilidad -Cogemos la muestra y con la mano contraria el asa,antes de quitar el tapón ponemos el asa incandescente,abrimos el tubo con ayuda de dedo meñique,enfriamos el asa al principio del cultivo liquido y bajamos hasta el fondo para obtener luna gota de muestra. -Pasamos la boca de tubo por la llama del mechero. -Cogemos el tubo donde vamos a realizar la siembra,abrimos,pasamos por la llama e introducimos el